Héctor Barberá (Aprilia) ha logrado la pole del Gran Premio de Assen de Motociclismo al conseguir un tiempo de 1.40'019. El japonés Hiroshi Aoyama (Honda) ha sido segundo a 0.173 segundos, seguido de Alvaro Bautista (Aprilia) y de Marco Simoncelli (Gilera) al que a tenor de los gestos que hacía al término de esta sesión, su moto no iba como él esperaba.
Al comienzo de los entrenamientos Simoncelli comenzó mandando con un tiempo de 1'41.164, pero pronto Aoyama y Barberá han comenzado a mandar en esta sesión. Más concretamente cuando quedaban 30 minutos de la tanda Aoyama cogió la cabeza de los cronos, seguido de Barberá y de Mattia Pasini.
Alvaro Bautista se ha mantenido en posiciones más retrasadas, buscando la puesta a punto de cara a la carrera. El líder del Mundial ha comenzado a atacar un cuarto de hora antes del final. Simoncelli también ha mejorado sus tiempos, pero finalmente ha sido Barberá el que ha marcado el mejor crono, logrando su segunda pole de la temporada.
Hay que destacar la magnifica actuación de Aleix Espargaró (Aprilia) que en el CEV estuvo probando la Moto2, el piloto ya está preparando la temporada 2010, y que hoy ha sido quinto, por delante del experimentado Alex Debón (Aprilia).
Del resto de los españoles hay que destacar la décimo tercera posición de Héctor Faubel (Honda) y la vigésima de Axel Pons (Aprilia).
En esta sesión de entrenamientos cronometrados del Gran Premio de Assen ha habido algunas caídas como la de Cluzel o la de Steve Bonsey.
| Pos | Piloto | Marca | Tiempo | Dif | Vel |
| 1 | Hector BARBERA | APRILIA | 1'40.019 | 0 | 252.0 |
| 2 | Hiroshi AOYAMA | HONDA | 1'40.192 | 0.173 | 248.5 |
| 3 | Alvaro BAUTISTA | APRILIA | 1'40.210 | 0.191 | 251.0 |
| 4 | Marco SIMONCELLI | GILERA | 1'40.320 | 0.301 | 249.1 |
| 5 | Aleix ESPARGARO | APRILIA | 1'40.796 | 0.777 | 248.2 |
| 6 | Alex DEBON | APRILIA | 1'40.830 | 0.811 | 249.2 |
| 7 | Raffaele DE ROSA | HONDA | 1'41.023 | 1.004 | 249.2 |
| 8 | Mattia PASINI | APRILIA | 1'41.055 | 1.036 | 252.9 |
| 9 | Mike DI MEGLIO | APRILIA | 1'41.072 | 1.053 | 248.2 |
| 10 | Lukas PESEK | APRILIA | 1'41.190 | 1.171 | 245.9 |
| 11 | Ratthapark WILAIROT | HONDA | 1'41.235 | 1.216 | 249.9 |
| 12 | Roberto LOCATELLI | GILERA | 1'41.347 | 1.328 | 254.6 |
| 13 | Hector FAUBEL | HONDA | 1'41.462 | 1.443 | 245.0 |
| 14 | Karel ABRAHAM | APRILIA | 1'41.533 | 1.514 | 248.3 |
| 15 | Thomas LUTHI | APRILIA | 1'41.545 | 1.526 | 253.2 |
| 16 | Shoya TOMIZAWA | HONDA | 1'42.038 | 2.019 | 243.5 |
| 17 | Jules CLUZEL | APRILIA | 1'42.628 | 2.609 | 251.7 |
| 18 | Stevie BONSEY | APRILIA | 1'42.697 | 2.678 | 245.8 |
| 19 | Alex BALDOLINI | APRILIA | 1'43.075 | 3.056 | 246.0 |
| 20 | Axel PONS | APRILIA | 1'43.470 | 3.451 | 245.0 |
| 21 | Valentin DEBISE | HONDA | 1'43.653 | 3.634 | 239.0 |
| 22 | Imre TOTH | APRILIA | 1'43.913 | 3.894 | 249.4 |
| 23 | Bastien CHESAUX | HONDA | 1'44.704 | 4.685 | 237.3 |
| 24 | Vladimir LEONOV | APRILIA | 1'44.743 | 4.724 | 242.0 |
| 25 | Toby MARKHAM | HONDA | 1'46.758 | 6.739 | 228.8 |
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